SKU： DR5001-HNHHeLa-Sce类别： 细胞背景 DNA 修复、非同源末端连接报告细胞标签：DNA 修复、NHEJ 描述试剂盒内容运输 + 存储资源基于细胞的非同源末端连接 (NHEJ) 筛选试剂盒动物细胞中的 DNA 修复途径可分为两大类：HR 和 NHEJ。 HR 或同源重组是一条次要途径，但对于保护细胞免受基因毒性非常重要。 NHEJ 是所有动物细胞中的主要修复途径，并在整个细胞周期中持续运行。 NHEJ 不仅容易出错，而且通过重新连接 DS DNA 断裂以维持基因组完整性而对生存也很重要。 NHEJ 的研究对于抗癌药物发现项目非常有益，可以更多地了解 NHEJ 修复过程并建立交叉途径和可药物途径靶标。 NHEJ 熟练程度在衰老中的作用也已被报道。

这是一种基于 HeLa 细胞的报告试剂盒，旨在让客户筛选或识别试剂（药物、天然产物、小分子、合成物、miRNA 和其他基因） ) t帽子影响或影响 NHEJ 修复。该试剂盒使用 GFP 作为细胞环境中 NHEJ 活性的原位读数。

DNA 持续暴露于基因毒性剂，导致细胞死亡和/或基因表达变化。在各种形式的 DNA 损伤中，最危险的是 DNA 双链断裂 (DSB)，这可能会因染色体易位等不适当重组而产生严重问题。为了应对 DSB 带来的威胁，细胞开发了多种机制来检测、发出信号并修复染色质区域。两条主要途径 HR 和 NHEJ 参与 DSB 的修复。这些途径进一步细分为更具体的子途径过程。在原核生物中，HR 被认为是 DSB 修复的主要途径，而在真核生物中，NHEJ 被认为占主导地位。这些途径在很大程度上彼此不同，但以互补的方式发挥作用。例如，NHEJ 不依赖于细胞周期，而 HR 则依赖于细胞周期。严重依赖于 S 相。 NHEJ 涉及两个没有同源性的 DNA 末端的连接，并且往往容易出错，而 HR 则具有高保真度并且基本上没有错误。在 NHEJ 中，断裂的 DNA 末端经过修饰以实现兼容性，然后简单地重新连接以恢复 DNA 完整性。当存在一定程度的微观同源性时，即使只有几个碱基对，重新密封步骤也会得到帮助。 NHEJ 过程通常会导致突变，但在某些情况下野生型序列会被恢复。

TopoGEN 科学家创建了一种新型的基于细胞的试剂盒，通过简单地检测 GFP 阳性细胞的存在来跟踪 NHEJ（图1).

这种基于细胞的/细胞背景系统的设计目的是让研究人员能够检查和询问活 HeLa 细胞中的 NHEJ 过程。该试剂盒使用突变的 GFP 报告基因，该报告基因具有两个 I-Sce1 位点g基因。当 I-Sce1 转染到 HN-HeLa 细胞系中时，不相容的 I-Sce1 断裂会被 NHEJ 修复，并且细胞变为 GFP 阳性（在 2-4 天的窗口内）。这些细胞可以通过实时成像进行追踪，或者使用细胞计数、细胞计数成像工具进行分析，或者简单地通过荧光计数 %GFP+ 细胞（参见图 1D）。

客户可以要求接收准备用于培养的报告细胞系（在环境温度下运输）。细胞在 4° C 下保存不超过 1 周 b电镀前。其他试剂应在收到后储存在 4°C（短期）或 -20°C（长期）下。客户还可以要求冷冻细胞，这些细胞必须放置在超低温冰箱 (-80° C) 或液氮储存中，直到可以使用为止。

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